產(chǎn)品描述

外泌體濃縮液是一款適用于大體積外泌體樣本的高效濃縮試劑，能快速處理大體積樣本。濃縮后的樣本可用于后續(xù)的外泌體分離純化、RNA 提取、蛋白提取等實驗。

本產(chǎn)品主要用于尿液和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的外泌體濃縮，但濃縮后的外泌體不適合直接進(jìn)行 NTA 粒徑分析、Western Blot、qPCR、NGS 測序、外泌體標(biāo)記或蛋白質(zhì)質(zhì)譜分析等。

訂購信息

運輸與保存

常溫運輸。4℃保存，有效期12個月。

使用方法

自備儀器、試劑與耗材：高速冷凍離心機(jī)、50mL離心管、無菌PBS。

1.     樣品預(yù)處理

(1)  去除細(xì)胞：對含細(xì)胞樣品，4℃，300g，離心 5min，將上清轉(zhuǎn)移至新離心管；無細(xì)胞樣品可跳過此步驟。

(2)  去除細(xì)胞及細(xì)胞碎片：4℃，2,000g，離心10min，將上清轉(zhuǎn)移至新離心管。

(3)  去除大體積顆粒：將步驟(2)獲得的上清液在4℃，14,000g，離心 30min，取上清轉(zhuǎn)移至新離心管。或選擇替代方法：將步驟(2)的上清液通過 0.2μm 微孔濾膜過濾，收集濾液。

2.     大體積外泌體樣本濃縮

(1)  將預(yù)處理后的樣品24mL加入50mL離心管，加入6mL外泌體濃縮液，上下顛倒充分混勻。注：樣本體積與外泌體濃縮液的比例為4:1，可按此比例調(diào)整樣本體積。為保證效果，推薦濃縮樣本體積不少于24mL。

(2)  室溫孵育60 min（快速流程）；如時間允許，推薦在 4℃ 過夜孵育（高回收流程）。

(3)  在4℃、12,000g 離心 30min，棄去上清。小心吸棄或倒出上清后，用200μL移液器盡量吸凈殘余上清。

3.     外泌體樣本重懸

(1)  向沉淀中加入適量無菌 PBS，用移液器輕柔上下吹打，充分混勻。注：無菌PBS的加入體積可靈活調(diào)整，但濃縮倍數(shù)不建議超過 50倍，推薦濃縮24-30倍。若將本試劑盒用于外泌體分離，按細(xì)胞培養(yǎng)上清/尿液樣本10mL，加入100μL無菌PBS進(jìn)行重懸。

(2)  待外泌體樣本溶解后，可用于外泌體分離純化、RNA 提取、蛋白提取等后續(xù)實驗。注：如不立即進(jìn)行后續(xù)實驗，可將溶解后的樣本置于-80℃保存（若24h內(nèi)進(jìn)行實驗，可4℃保存）。如進(jìn)行外泌體分離純化，可選擇沉淀法外泌體分離產(chǎn)品 (貨號：AC15L412) ，SEC法外泌體分離產(chǎn)品 (貨號：AC25L434) ，或磁珠法外泌體分離產(chǎn)品 (貨號：AC25L422) 或 (貨號：AC25L423)。

注意事項

1． 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。

2． 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3． 使用過程中，盡量在無菌環(huán)境開啟瓶蓋，減少對試劑的污染。

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本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。